实验动物的微生物学和寄生虫学总结
实验动物的微生物学、寄生虫学质量监测
监测方法:寄生虫GB/T18448细菌GB/T14926
我国实验的质量保障体系1实验动物许可证2种子种源基地3质量监测
4社会化生产供应
感染的危害:
感染的危害威胁人类健康影响动物生产影响实验结果污染实验材料
寄生虫对实验动物的影响
实验动物标准1环境设施2动物质量3动物遗传
4营养和饲料,笼具
检测频率
普通级动物：每三个月至少检测动物一次。清洁级动物：每三个月至少检测动物一次
无特定病原体动物：每三个月至少检测动物一次
无菌动物：每年检测动物一次。每2-4周检查一次动物的生活环境标本和粪便标本。
实验动物主要疫病及人兽共患传染病
1流行性出血热（EHF）临床表现：发热、出血和肾脏损害布尼亚病毒科，汉坦病毒属为吸入型感染和接触型感染特点：对脂溶剂敏感；
PH5.0以下，60℃，1h可使其全部杀死；紫外线照射30分钟灭活病毒预防与控制
防止野鼠进入设施；
实验大、小鼠群定期进行血清学检测；
加强实验室管理，防止饲料、垫料等被野鼠污染。饲养人员和实验人员应加强防护措施，定期体检。
2淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（LCMV）：侵害中枢神经系统，呈现脑脊髓炎症状。感染后目前还无法治疗。为砂粒病毒科、砂粒病毒属
特点：乙醚和去污剂敏感；
不耐热，56℃20min即可灭活；紫外线也可将其灭活临床症状和病理变化
人感染后可引起流感样症状或脑膜炎。小鼠带毒后可表现为无症状的带毒者。
小鼠感染LCMV依年龄、感染途径及其他因素的不同，可表现为脑型、内脏型和迟发型三种类型发现小鼠已被感染，应将小鼠全部淘汰，房舍彻底消毒后，重新引种，建立新种群
3狂犬病：典型的病理变化为化脓性脑炎弹状病毒科，狂犬病毒属
特点：酸、碱、石炭酸、新洁尔灭、甲醛、升汞等消毒液敏感。
能被日光、紫外线、超声波、1%～2%肥皂水、70%乙醇、0.01%碘液、丙酮、乙醚等灭活临床症状和病理变化
分为狂暴型和麻痹型。狂暴型分3期，即前驱期、兴奋期和麻痹期。
麻痹型犬始见于头部肌肉，表现吞咽困难，随后四肢麻痹，最终全身麻痹而死亡
4猴逆转录病毒包括4种病毒：猴逆转D型病毒（SimianretrovirusD,SRV）、猴免疫缺陷病毒（Simianimmunodeficiencyvirus,SIV）、猴T细胞趋向性病毒1型（SimianTlymphotropic,STLV-1）、泡沫病毒（Simianfoamyvirus,SFV）。
5弓形体生活史：5个形态阶段：速殖子、包囊、裂殖体、配子体和卵囊。
发育过程需两个宿主，小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、犬和猴为中间宿主，猫为终末宿主。
6鼠痘病毒（MousePoxVirus）感染实验小鼠引起的一种烈性传染病。
临床表现为全身或局部皮肤痘疹，四肢、尾和头部肿胀、溃烂、坏死甚至脚趾脱落为特征，故又称为传染性脱脚病。多呈暴发性流行，致死率较高，危害极大。痘病毒科，痘病毒亚科，正痘病毒属特点：对干燥、低温抵抗力较强，
在潮湿环境下60℃10分钟即可灭活。氧化剂、次氯酸盐和氯化锰能灭活病毒。0.2%甲醛可破坏病毒的传染性临床上分为三种病型。
急性致死型：多见于初次发病的鼠群，于4-12小时死亡。病理变化可见肝坏死严重，脾、肠也可见到坏死灶。亚急性型-慢性经过型：可见典型的缺脚畸形症状，病理变化可见脾脏肿大和淋巴结肿大，皮肤炎性水肿、坏死。无症状耐过型：动物外观健康无病变，但在小鼠体内有病毒增殖，成为带毒动物。
7小鼠肝炎病毒：临床表现为肝炎、脑炎和肠炎为冠状病毒科、冠状病毒属特点：对酸稳定，
不同毒株对热的稳定性不同，
低毒力毒株和对热稳定的毒株是实验鼠群最严重的污染物鼠群一旦感染，必须淘汰整个鼠群。
8小鼠仙台病毒：副粘病毒科，副粘病毒属特点：对乙醚及热敏感；
pH3.0条件下极易灭活。一旦感染，淘汰感染鼠群
9兔出血症病毒（RHDV）：细小病毒科，细小病毒属特点：对氯仿和乙醚不敏感，能耐酸；
紫外线和干燥等不良环境的抵抗力较强。
1%氢氧化钠4小时、1%-2%甲醛、1%漂白粉3小时才被灭活。实验动物微生物感染的影响
直接影响：
（1）引起人畜共患病，影响工作人员的身体健康。
（2）引起动物传染病，影响均衡生产，影响动物健康和质量。（3）严重干扰实验结果的可靠性、准确性、重复性。（4）污染环境
间接影响：
（1）引用不正确的实验结果可能会导致临床的错误治疗。（2）用不健康的动物材料制成生物制品可扩散疾病。（3）重复实验可造成新的人力、物力、才力的浪费。
实验动物防疫1防疫原则
2传染病流行的基本环节3防疫措施
实验动物防疫原则？
1．隔离饲养：不同种动物要分开饲养，严禁混养在一起。防止交叉感染。
2．引进动物要严格检疫：依据国家检测标准进行，严格检疫。要从具有质量合格证的单位引进动物。3．坚持卫生消毒制度：杜绝各种病原微生物的侵入和繁殖。要定期对动物房舍和饲养用具进行消毒。4．人员健康检查：饲养管理人员要定期进行健康检查，有人畜共患病者，应调离与动物接触的工作岗位。5．动物质量检查：保种单位、生产单位要对饲养的动物定期进行质量检查，发现问题及时更新种群。6．动物免疫制度：对国家标准要求必须实施预防接种的实验动物要定期进行免疫接种。7．隔离和无害化处理：严格防止野生动物进入实验动物室，对死亡动物进行无害化
传染病流行的基本环节？
1.传染源：主要是患病动物（潜伏期、发病期和恢复期动物）和携带病原体动物、野鼠等。实验动物的分泌物及排泄物污染的设施、垫料、饲料、饮水、空气、用具等都是病原体传播的媒介。2.传播途径：（1）直接传染直接接触传染包括水平传播、垂直传播（2）间接传播：通过媒介传播。包括非生物性传播如空气飞沫、尘埃等。生物性传播包括节肢动物（苍蝇、蚊子等）；野生动物如野生啮齿类动物等；患病的实验动物；饲养、实验人员不注意卫生防疫传染病原体。
3.易感动物要做好实验动物的卫生防疫，就要彻底控制以上三个流行环节
动物传染病防制的具体措施？
1、根据不同等级的实验动物分别制定科学的饲养管理和卫生防疫制度，并严格执行。
2、根据不同等级的实验动物的要求建立合理的环境设施，严格区分实验动物繁育区与动物实验区，且各种动物要分开饲养，以防交叉感染。
3、坚持平时的各项卫生消毒灭菌制度，对实验动物的房舍、用具等定期进行消毒或灭菌，杜绝各种微生物的侵入。4、自繁自养自用，引进的动物只有确认健康后才能与原设施内动物合群或投入使用；不得从疫区引进动物。5、外环境定期进行杀鼠灭蝇的工作，防止野生动物和昆虫进入动物饲养室或动物实验室。6、工作人员定期进行健康检查，患有传染性疾病的人员不能从事实验动物工作。
7、发现疫情及时上报，迅速隔离患病动物，危害性大的疫病采取封锁、扑杀等综合性措施，将患病动物进行焚烧，污染的环境及用具应进行彻底严密的消毒或灭菌。
8、开展经常性的卫生检疫，发现疫情，及时采取相应的防治措施。
人兽共患传染病:流行性出血热淋巴细胞脉络丛脑膜炎狂犬病B病毒猴逆转录病毒弓形体钩端螺旋体结核病
动物烈性传染病:鼠痘小鼠肝炎仙台病毒兔出血热
扩展阅读：实验动物微生物学、寄生虫学质量控制
一、名词解释
1、病毒的基本特征：①病毒只含有一种核酸，DNA或RNA。②严格的细胞内寄生，没有完整的酶系统，不能独立进行生长和繁殖。③无合成蛋白质所必需的酶，必须利用宿主细胞的酶及其他物质。④对一般抗生素不敏感，但对干扰素敏感。
2、致病菌：引起动物疾病，严重危害动物健康的细菌，如沙门氏菌、志贺氏菌、巴氏杆菌、鼠棒状杆菌等。
3、条件致病菌：一般不引起动物发病，但在应激条件下，机体免疫力降低时，可引起动物的疾病的细菌，如绿脓杆菌、金黄色葡萄球茵引发动物的菌血症和体表脓肿等。
4、正常菌群：对动物无致病作用，在一般情况下对机体产生有益的生理作用的细菌，如普通大肠杆菌、乳酸杆茵等。
5、寄生虫的传播媒介：指在脊椎动物宿主间传播寄生虫的一种低等动物，如传播血液原虫的吸血节肢动物。
6、普通动物（CV）：是在微生物学控制上要求最低的动物，它要求不携带人畜共患病和动物烈性传染病的病原。该种动物饲养于普通环境中。
7、清洁动物：是一类除了普通动物应排除的病原体外，尚不能携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原体的动物。
8、SPF动物：是指动物体内无特定的微生物和寄生虫存在的动物，除普通级和清洁级必须排除的微生物和寄生虫外，SPF级动物还必须排除对实验有干扰的微生物和寄生虫。9、无菌动物（GF）：是指用现有的检测技术在动物体内外的任何部位均检不出任何微生物和寄生虫的动物。10、悉生动物（GN）：又叫已知菌动物或己知菌丛动物，是指在无菌动物体内植入一种或几种己知微生物的动物。
二、是非题（下列试题中正确的用（√）号错误的用（X）号）
l、犬普通级必须排除狂犬病毒、犬细小病毒、犬瘟热病毒、大传染性肝炎病毒，且必须对狗做这四种病毒疫苗的预防接种。（√）2、犬普通级必须排除狂犬病毒、犬细小病毒、犬瘟热病毒、犬传染性肝炎病毒，且血液中不能有这四种病毒的抗体。（X）3、猴普通级必须排除B病毒。（√）4、猴普通级必须排除狂犬病毒。（X）
5、病原真菌多为人畜共患，且真菌孢子即易飞扬，污染环境威胁实验人员的健康。（√）6、病原真菌面广量大，但对人没有很大威胁。（X）
7、高热灭菌可分为干热灭菌法和湿热灭菌法，干热灭菌效力更强。（X）8、高热灭菌可分为干热灭菌法和湿热灭菌法，湿热灭菌效力更强。（√）9、霉菌和酵母对营养要求均较低，可在简单的沙氏培养基上良好地生长。（√）10、霉菌和酵母对营养要求均较高，能在营养肉汤培养基上良好地生长。（X）11、能以有性（如孢子）或无性（芽生、裂殖等）方式繁殖的微生物是真菌。（√）12、能以有性（如抱子）或无性（芽生、裂殖等）方式繁殖的微生物是细菌。（X）13、真菌能在饲料中繁殖，产生危害动物的代谢产物，称之为真菌毒素。（√）
14、疥螨在宿主皮肤的浅层挖掘隧道，在隧道中生活，这种寄生虫称为体外寄生虫。（√）三、选择题（请选择ABCD中的一项）
1、对自然宿主、人和其他动物均有较强的致病性的人畜共患病原A。
A狂犬病病毒B兔出血症病毒C小鼠肝炎病毒D鸡白血病病毒2、对自然宿主致病性弱，但可引起人的致死性感染的病毒是D
A小鼠脱脚病病毒B免出血症病毒C小鼠肝炎病毒D流行性出血热病毒3、下列病原体中对人和动物均有较强致病性的人畜共患的病原体是A。A淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒B鼠痘病毒C仙台病毒D猴病毒404、自然宿主致病力强，常引起爆发流行，甚至毁灭整个动物群的病原体是B。A猴病毒40B兔出血症病毒C小鼠肝炎病毒D鸡白血病病毒
5、自然宿主致病力强，常引起爆发流行，甚至毁灭整个动物群的病原体是B。
A淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒B鼠痘病毒C仙台病毒D猴病毒40
6、对自然宿主有一定的致病性，可引起疾病流行，影响动物的健康，并对研究工作产生严重干扰的病原体是C
A狂犬病病毒B兔出血症病毒C小鼠肝炎病毒D鸡白血病病毒
7、对自然宿主有一定的致病性，可引起疾病流行，影响动物的健康并对研究工作产生严重干扰的病原体是C。
A淋巴细胞脉络从脑膜炎病毒B鼠痘病毒C仙台病毒D猴病毒40
8、对自然宿主、人和其它动物都无明显的致病性，但可污染生物制剂。肿瘤移植物和细胞培养物的病原体是D。
A淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒B鼠痘病毒C仙台病毒D猴病毒409、下列病原体中对人和动物均有较强致病性、人畜共患的病原体是A。
A沙门氏菌B泰泽氏菌C鼠支原体D松鼠狼疮疹病毒
10、对自然宿主致病力强，常引起爆发流行，甚至毁灭整个动物群的病原体是B。A出血热病毒B泰泽氏菌C小鼠支原体D松鼠猴疟疾病毒
11、对自然宿主有一定的致病性，可引起疾病流行，影响动物的健康并对研究工作产生严重干扰的病原体是C。
A出血热病毒B泰泽氏菌C鼠支原体D松鼠狼疮疹病毒
12、对自然宿主无明显的致病性，但可传染给人引起致死性感染的病原体是D。A结核分枝杆菌B多杀性巴氏杆菌C鼠支原体D猴疮疹病毒（B病毒）13、对自然宿主无明显的致病性，但可传染给人引起致死性感染的病原体是D。A结核分枝杆菌B多杀性巳氏杆菌C鼠支原体D流行性出血热病毒14、小鼠普通级动物必须排除的细菌是D。
A肺炎克雷伯氏菌B肺支原体C多杀巴氏杆菌D沙门氏菌
15、对自然宿主有一定的致病性，可引起疾病流行，影响动物的健康，并对研究工作产生严重干扰的病原体属小鼠清洁级动物必须排除的细菌是B。
A肺炎克雷伯氏菌B肺支原体C金黄色葡萄球菌D沙门氏菌
16、对自然宿主、人和其它动物都无明显的致病性，但属条件性致病菌，无特定病原体级动物必须排除的细菌是A。
A肺炎克雷伯氏菌B肺支原体C多杀巴氏杆菌D沙门氏菌
17、对自然宿主、人和其它动物都无明显的致病性，但属条件性致病菌，小鼠无特定病原体级动物必须排除的细菌是A。
A绿脓杆菌B肺支原体C多杀巴氏杆菌D沙门氏菌
18、小鼠普通级动物必须排除的细菌是D。
A肺炎克雷伯氏菌B肺支原体C多杀巴氏杆菌D皮肤病原真菌
19、对自然宿主有一定的致病性，可引起疾病流行，影响动物的健康，并对研究工作产生严重干扰的病原体属小鼠清洁级动物必须排除的细菌是C。
A肺炎克雷伯氏菌B金黄色葡萄球菌C多杀巴氏杆菌D沙门氏菌20、小鼠普通级动物必须排除的病毒是D。
A仙台病毒B小鼠细小病毒C小鼠肺炎病毒D淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒21、对自然宿主、人和其它动物都无明显的致病性，但可污染生物制剂、肿瘤移植物和细胞培养物的病原体，属小鼠无特定病原体级动物必须排除的病毒是B
A仙台病毒B小鼠细小病毒C小鼠脱脚病病毒D淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒22、小鼠普通级动物必须排除的病毒是D。
A仙台病毒B小鼠细小病毒C小鼠肺炎病毒D小鼠脱脚病病毒
23、对自然宿主有一定的致病性，可引起疾病流行，影响动物的健康，并对研究工作产生严重干扰的病原体属小鼠清洁级动物必须排除的病毒是A。
A小鼠肝炎病毒B小鼠细小病毒C小鼠肺炎病毒D小鼠肺炎病毒24、小鼠普通级动物必须排除的病毒是D
A仙台病毒B小鼠细小病毒C小鼠肺炎病毒D流行性出血热病毒25、兔普通级动物必须排除的病毒是D
A仙台病毒B兔粘液瘤病毒C轮状病毒D兔出血症病毒26、普通级兔必须排除的细菌是D。
A肺炎克雷伯氏菌B肺支原体C多杀巴氏杆菌D皮肤病原真菌27、普通级兔必须排除的细菌是D。
A绿脓杆菌B肺支原体C多杀巴氏杆菌D沙门氏菌28、普通级啮齿类动物和兔必须排除的寄生虫是A。
A体外寄生虫B兔脑胞内原虫C卡氏肺抱子虫D栓尾线虫29、普通级啮齿类动物和兔必须排除的寄生虫是A。
A弓形体B脑胞内原虫C卡氏肺抱子虫D栓尾线虫四、填空题
l、病原真菌根据其侵袭部位以及发病的条件，大体划分为浅部真菌、深部真菌和条件致病真菌三类。
2、实验动物寄生虫感染的来源主要是被污染的垫料、水、饲料以及中间宿主和传播媒介。3、寄生虫的综合防治措施主要包括以下三个方面即驱虫、环境卫生和管理制度。五、问答题
l、确诊病毒的存在的主要依据是什么？
答：在细胞培养或病变组织的切片中检查到包涵体；接种于动物、鸡胚或细胞，动物发病，鸡胚死亡，在鸡胚组织、绒毛尿囊膜上出现可见病变，用血清学方法可探测到病毒存在：应用荧光抗体技术或免疫电镜技术，证明某病毒的存在；应用血清学方法检测证明病毒的存在。2、细菌的生长繁殖需要什么条件？
答：①营养条件：细菌的生长繁殖要求一系列营养成分，如水分。含碳化合物、含氮化合物、矿物质和必需的生长因子等。②温度：细菌生长有最适温度和温度范围，超过最高或低于最低温度范围，细菌的活动和生长均告停止。一般病原菌的最适温度与人畜的体温相近似。③氢离子浓度（PH）：PH对细菌生长的影响很大，多数病原菌生长的最适PH为7.2-7.6。④渗透压：细菌细胞需要在适宜的渗透压下，才能生长与繁殖。⑤气体：氧气和二氧化碳的浓度对细菌的发育和繁殖有明显的影响。
3、微生物和寄生虫对被感染的实验动物的主要危害是什么？
答：携带人畜共患病的病原体，能直接威胁人类和动物的健康；烈性传染病不仅会导致整个动物群的毁灭，也能使整个动物群带毒，带毒群体难以净化，会反复爆发疾病，造成生产和研究的巨大损失；干扰实验结果，如导致实验中止、重复性差、或结果无法解释，造成人力、物力和时间的极大浪费：污染生物制品，生物制品带毒造成疫病蔓延，带毒的生物材料使肿瘤移植失败、细胞培养污染、胚胎操作与动物胚胎工程无法正常进行
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