技术总结
生物技术在小麦育种中的应用
小麦是世界上种植面积最广,总产量最多的粮食作物。小麦含有较多的蛋白质,营养价值高,可作多种主食和副食的加工原料,比较耐储藏,许多国家将之视为战备储备粮。在育种方面,除常规育种之外,与细胞生物学和分子生物学相结合的育种方法也推陈出新,使得小麦的基因分析研究得到迅速发展。小麦遗传图谱的建立以及图谱所涉及的形状已从形态、生长发育、对病虫害抗性和环境胁迫的耐性扩展到各种蛋白质和酶以及核酸的分子标记,转基因技术的不断完善,转基因植株的培育以及分子标记辅助选择在小麦育种的广泛利用等为小麦育种的发展增添了活力。
然而,具有巨大应用潜力的很多现代生物技术还没有在小麦育种中发挥应有的作用,近年来以高分子量麦谷蛋白、醇溶蛋白为代表的蛋白标记,以RAPD、SSR、ISSR、STS、AFLP等为代表的DNA分子标记,以及基因枪、农杆菌和花粉管通道转基因技术已基本成熟,并逐步在小麦育种中得到应用。
1.蛋白标记
小麦各个组织均有蛋白分布,而子粒蛋白的研究最多、最深入。小麦子粒蛋白按其溶解性可分为:溶于水的白蛋白、溶于盐的球蛋白、溶于醇的醇溶蛋白、溶于酸或碱的谷蛋白。小麦子粒蛋白与子粒的发育、品质性状和营养有关。并具有丰富的多态性,可以作为小麦育种的蛋白标记。1.1高分子量谷蛋白
小麦所有高分子量谷蛋白亚基(HMWGS)均是由位于第1部分同源群染色体长臂上的复等位基因控制,分别命名为GluA1、GluB1、GluD1,统称Glu1。麦谷蛋白及其亚基组成和含量决定着面团的弹性。在了解高分子量麦谷蛋白亚基组成与不同加工品质之间的关系后,就可以通过SDSPAGE电泳跟踪目标蛋白带,在杂交后代中选择具有育种目标组合的理想单株。1.2麦醇溶蛋白
麦醇溶蛋白约占小麦种子贮藏蛋白的40%,是主要的贮藏蛋白.其组成和含量决定了小麦面团的延伸性和粘性。小麦醇溶蛋白在结构上为单亚基,在酸性条件下(约pH3.1)经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后,电泳谱带按分子量大小和迁移率的不同可分为α、β、γ和ω等个区。由于醇溶蛋白在不同小麦种质间具有高度多态性和不受环境影响的特点,醇溶蛋白被用于小麦品种鉴定、种子纯度检测、亲缘关系分析、品质预测,以及种质资源遗传多样性分析、物种的起源和进化研究等方面。然而,醇溶蛋白丰富的多态性还未被有效应用到小麦的育种实践。
醇溶蛋白的多态性可以揭示小麦种质资源之间的遗传差异,结合其他分子标记、农艺性状和高分子量谷蛋白组成分析等信息,可为小麦育种的亲本选配提供科学依据。另外,麦醇溶蛋白与小麦的品质性状有关已经是学术界的共识,但醇溶蛋白与品质性状的确切关系仍不太清楚,需要进一步研究。因此,目前醇溶蛋白在小麦育种中的应用仅局限在遗传差异分析上。
2.DNA分子标记
分子标记是基于DNA变异的标记类型,直接揭示基因组之间在DNA序列上的差异。与其他遗传标记类型相比。分子标记具有很多优点:直接反映DNA序列差异,在各个组织、不同发育时期均可检测,不受季节、环境、表达与否的影响;数量多,遍布整个基因组,检测位点近于无限;多态性高,植物中自然存在很多变异,表现为“中性”,不影响目标性状的表达;许多分子标记类型为共显性,能够鉴别出纯合基因型和杂合基因型。分子标记已经广泛应用于植物遗传图谱的构建、种质资源分类鉴定和分子标记辅助育种等领域。2.1分子标记的主要类型
分子标记技术发展迅速,目前已有种类繁多的分子标记。根据标记检测方法一般可将分子标记分为以分子杂交为基础的标记和以PCR(polymerasechainreaction)为基础的分子标记两大类。在小麦抗白粉病基因分子标记筛选、遗传作图和标记辅助育种中主要涉及酶切片段长度多态性(restrictionfragmentlengthpolymorphism.RFLP)、随机扩增多态性DNA(randomamplifiedpolymorphicDNA.RAPD)、扩增片段长度多态性(amplifiedfragmentlengthpolymorphism.AFLP)、序列特异性扩增区域(sequencecharacterizedamplifiedregion.SCAR)、序列标签位点(sequencetaggedsites.STS)和简单序列重复(simplesequencerepeat.SSR)等六种分子标记。多样性阵列技术(Diversityarraystechnology.DART)是建立在基因芯片杂交技术上的新型分子标记筛选技术。该技术能同时分析分布于基因组中的几百个多态性位点,而不需要预先知道序列信息。DArT已经应用于小麦的遗传作图和指纹分析。DArT是一个高通量、快速、高可重复性的新方法。2.2分子标记在小麦育种中的应用
目前,分子标记在小麦育种中的应用主要在2个方面,遗传多样性分析和标记辅助育种。RAPD、SSR、ISSR(Intersimplesequencerepeatpolymor.phicDNA)和AFLP等分子标记可以显示较多的多态性条带,在小麦品种间的遗传差异分析中具有很大应用潜力。遗传差异的大小决定杂交后代的分离强度,因此可以为杂交亲本的选配提供依据。当筛选到与目标性状紧密连锁的分子标记后,分子标记辅助选择就可在育种程序中发挥作用,大大提高育种的选择效率和育种进程。分子标记辅助选择对于质量性状的选择是稳定可靠的,也是目前应用最成功的。而对于多基因、微效的数量性状的选择效果仍有待提高。
3.转基因研究
小麦是世界上最重要的作物之一,但却是最后成功获得转基因植株的禾谷类,原因是小麦遗传因素决定的组织培养和转基因再生植株获得上的巨大困难。最近20年有各种不同的方法用来将外源DNA导人小麦,其中最重要的是基因枪法和农杆菌法。除了基因枪法和农杆菌法外,在我国小麦研究中广泛应用的转基因方法还有花粉管通道法。目前,小麦转基因技术是小麦功能基因组研究和育种研究的重要方法。如:将构建在玉米泛素启动子Ubil下游的水稻几丁质酶基因(chill)转入高产小麦品种‘周麦18’,通过PCR检测获得了纯合转基因株系。白粉病抗性鉴定表明,转基因植株的白粉病反应型可降低l一3级,达到中抗至高抗水平。虽然转基因技术已经趋于成熟,但要获得稳定遗传的转基因小麦仍很困难。基因枪法是转基因的主要方法;花粉管通道法在我国得到了普遍应用,并具有较好的效果;农杆菌法的转化效率仍有待提高。应用转基因技术对小麦性状的改良主要包括:抗病性、抗寒(冻)性、抗旱性、抗穗发芽以及品质性状。
4.胚挽救技术培育远缘杂种
杂种胚早期败育一般是由于胚乳发育不正常或是杂种胚育胚乳之间生理上的不协调而引起。因此,许多种间与属间杂交,受精和早期的胚发育还是能进行的,但在胚成熟前就死亡,不能形成成熟的种子。在胚败育之前,对杂种胚进行人工培养就可克服胚发育的生理障碍,从而获得种间或属间杂种。周传恩等已建立起成熟的小麦体细胞杂种再生系统,并且通过胚拯救获得了可育的小麦与高冰草体细胞杂种植株及其后代,通过杂种的胚拯救与亲本回交后的幼胚拯救,可望获得其他不同组合的体细胞杂种后代。
综上所述,子粒蛋白可以作为标记进行标记辅助选择;在明确DNA分子标记与一定农艺性状连锁后,也可用于标记辅助选择;转基因技术打破了物种的生殖隔离,可以将外缘物种的基因转入小麦遗传背景中。由此可见,应充分利用现代生物技术的发展有目的、有计划、高效率的促进小麦品种改良。参考文献:
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扩展阅读:专业技术工作总结(评职称时写的)
专业技术工作总结
本人从1993年7月参加工作以来,先后在****峨西建筑公司、四川省**实业有限公司、四川**建设集团等施工单位、开发公司从事现场施工技术管理及造价管理工作。在各阶段工作中,认真学习建筑相关专业技术知识,在实践中努力推行“新工艺、新材料”,对科技创新和技术进步倾注了满腔热情。对现场技术管理,严格按照国家相关法律法规、规范,做到一丝不苟,按图施工,保障了工程质量,所施工的工程未出现过重大质量事故。对安全文明施工管理更是常抓不懈,对所管理的每个工程,均达到了开工前制定的安全文明目标。对工程预决算部分,严格按照清单计价规范及定额计算规则,对每个项目努力做到无漏套、错套清单及定额,人工费及材料费的调整均严格执行国家相关的文件进行。
一、从参加工作以来,先后完成了以下主要工程:
1、1993.8-1994.4*******家属楼(砖混6层4560m2),任施工员,获得优良工程。2、1994.5-1996.3******商住楼(底框砖混6层21300m2),担任施工员,工程合格。3、1996.8-1998.2******商住楼(底框砖混7层8500m2),担任主办施工员,工程合
格。
4、1998.2-1999.8*******商住楼(框架7层16580m2),担任主办施工员,工程合格。5、1999.8-201*.6******花园(砖混6层24600m2),担任主办工长,工程合格。6、201*.7-201*.6******小区(底框砖混7层35674m2),担任技术负责人、造价管
理,工程合格。
7、201*.7-201*.2攀枝花*****广场(框剪含地下室,部分8层,部分6层共56800m2),
担任主办工长兼技术负责、造价管理,工程合格。
8、201*.3-201*.8*****(多层框架,6+1层,建筑面积28723.31m2),任造价管理,
工程结算通过公司内部审计及外审,误差率0.41%,符合要求。
9、201*.8-201*.5******工程(5栋6+1多层11664.49m2,高层18-33层50777.97m2。
总计建筑面积62442.46m2),工程月进度款及结算均在可控范围内。
10、201*.8-201*.5*******工程(9层内,建筑面积85827.09m2)。工程月进度款及
结算均在可控范围内。
二、对建筑工程施工及造价管理工作感悟
通过以上工程的现场管理及造价管理,本人对建筑工程施工技术及施工流程,对工程预结算流程及工程量计算娴熟。能适应不同的工程结构及不同的工作环境。灵活运用积累的经验及知识进行突发事件的处置。要做好一个工程,我认为要从以下几个方面进行:1、
做好施工前的准备工作,才能高效准确的做好工程。开工前技术资料的
准备,直接关系到工程质量的优劣、工程进展顺利与否。开工前要熟悉图纸、合同及有关文件,做好图纸的自审工作,即使发现问题,提出问题。编制好施工预算和施工组织设计,为施工所需的各项资源提供依据。施工预算应根据项目本身的实际情况及项目部相关经验技术进行编制,应具备实际可操作性。对工程进度款应按工程实际进度情况进行申报,做到不漏报、不多报,并及时跟踪,确保项目资金按工程进度计划到位保障工程的顺利进行。项目部人员的配备,必须合理,各岗位专业技术人员应根据工程的特点进行配置。劳动力的分配应事先做好计划,避免停窝工事件的发生。做好工人进场安全文明教育及专业技术教育工作,并在各专业工作开始前,做好技术交底,让参与该项工作的人能清楚的知道自己该干什么,做到什么程度。做好施工现场的布置工作,避免无计划布置场地,造成场地混乱,利用率低,安全文明施工无法实现等问题。根据施工组织设计做好材料及机械设备的供应准备,保障工程施工顺畅。在201*-201*年*****广场工程的施工中,从工程开工前,我就组织项目部相关人员对图纸进行认真研究、探讨,做出了一个符合本工程特点的、贯穿全施工过程的施工组织设计。并对易出现的质量、安全问题,均提出了重点监控措施。
在施工过程中,真正做到了防患于未然。对各种施工中出现的问题,我们都制定了一套应对措施,当这些问题暴露时,项目部各管理人员均能从容应对,并能在相关要求内纠正。保障了工程质量。2、
施工过程中对工程质量应常抓不懈、从细节中决定质量,确保工程质量201*年7月,我在成都市*******工地担任技术负责人,该工程建筑面积35000m2。部分底框,其余砖混结构的住宅小区。工程开工以来,砖砌体工程质量作为工程重要部分,被当做工程的重要控制方向。在砖砌体施工前,组织了项目部相关技术人员及各砌体班组专门召开了砖砌体质量控制专题会议。认真学习《砖砌体施工质量验收规范》GB50203-201*。下面就砖砌体质量控制方面的一些情况总结如下:
对砖砌体的轴线控制,要求各栋号均采用在楼板上放出轴线及控制线进行控制,控制线距墙边8cm,用墨线弹出在楼板上,便于检查轴线偏差。如果按传统放线不做控制线的话,工人将砖砌体砌筑好后,检查轴线偏差比较麻烦。有控制线后,可随时抽查轴线偏差情况,用卷尺测量控制线到墙边的距离,即可知道轴线偏差,对误差超过规范要求的,立即纠正,避免造成较大损失。
在砌体标高控制上,采用专用匹数杆进行控制,立皮数杆要保持标高一致,盘角时要均匀掌握灰缝,砌筑时小线要拉紧,不得一层线松,一层线紧,以防水平灰缝出现大小不匀。并在墙体砌筑高度超50cm后,在墙上放出50线,便于检查控制。具体控制参数参考规范及本工程实际情况,制定为:轴线偏移≤5mm,外墙窗洞口偏差≤10mm,砌体标高≤+20mm、垂直度≤3mm,平整度≤5mm,灰缝平直度≤8mm,外墙灰缝饱满度≥95%,内墙90%;
对砂浆饱满度的控制上,刚好当地建设部门推广使用砂浆王,再仔细研究了相关检测报告及论证的情况下,为了提高工人的工作效率及降低工程成本,
采用了在砂浆中掺入水泥用量的2%砂浆王,这样既能满足饱满度的要求,也能提高工人的工作效率,还能在不改变砂浆强度的情况下降低砂浆中水泥含量,降低工程造价。
在砌体拉结筋及构造柱马牙槎留置上,严格按照规范要求。马牙槎严格执行先退后进的做法,并根据标砖模数,严格按照5进5退进行施工。砖墙与构造柱之间应沿墙高每50cm设置2Ф6mm水平拉结钢筋,每边伸入墙内不应少于1.0m。砖上楼前必须专人湿隔夜水,施工现场配备油桶随时对砖进行补充湿水。
由于准备充分,技术方法深入班组及管理人员心中,该工程砌体质量一直处于优良状况,得到了监理单位及质监站的一致好评。3、
对安全控制,更是必须常抓不懈。特别是基本的“三宝”“四口”“五临
边”等,必须严格按安全规程要求进行防护。一旦发生安全事故,对工程本身及公司都是不小的影响。项目部管理人员平时均应带头遵守安全技术规程及项目部制定的安全规章。4、
做好技术及安全资料的收集整理。在工程建设中,各种资料是反映建筑
工程施工情况的最直接、准确的证据。平时必须做好工程资料的收集及整理工作,如实填写工程相关资料,并及时请相关人员签字。资料整理应根据工程不同部位及资料的性质进行分类。各种技术资料应如实的反映工程的实际情况。5、
工程竣工后,要及时整理装订相关质量保证资料,报送竣工结算书,严
格按照相关规定进行报审备案。确保工程能顺利竣工交付使用。结算书要严格按竣工图纸、相关变更资料、签证、施工合同及招投标文件进行编制。做到每个清单项目有依据,定额内容符合清单项目特征。对变更及签证内容,应分段落进行报送,便于对量及审计。材料价格及人工费的调整,应严格按照合同及相关法律法规的要求进行调整。
6、作为甲方预结算人员。在招投标过程中,招标文件的编制应符合过程实
际情况,应对招标清单的项目特征描述清楚,符合设计要求及施工规范,严格根据施工图纸,做到不漏项。控制价应按照现行施工技术及相关规范,结合施工图纸计算合理的工程量进行计价,材料价及人工费应符合相关规定及市场行情。定额套用准确,定额子目应与清单项目特征相符。在对施工方进度款及结算审计中,应本着实事求是的原则。严格按照工程实际进度及相关变更资料及签证资料,并实地查看,对符合施工图纸及设计变更的按实计价。对实际发生,但无设计变更及签证资料的,应了解实际情况,对应补办签证的,敦促乙方进行补办。对不符合补办条件的,严格按照合同及招投标文件规定执行。对工程结算每个有疑问的部分,请乙方预算人员给予解释,做到公正、公平、合理的进行造价结算工作。
以上是我这些年来从事的主要技术工作的情况,通过从书本上学习、从实践中学习、从他人那里学习,再加之自己的分析和思考,确实有了较大的收获和进步。成绩和不足是同时存在的,经验和教训也是相伴而行,我将继续努力,克服不足,总结经验,吸取教训,把自己的工作做得更好。
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